LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源用于棉花功能基因篩選和視覺標記

近日，河南大學(xué)在《Front Plant Sci.》期刊發(fā)表文獻《Optimizing the Protein Fluorescence Reporting System for Somatic Embryogenesis Regeneration Screening and Visual Labeling of Functional Genes in Cotton》，文獻中指出利用LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)光源能夠棉花基因的篩選。下面是文獻摘要，文獻全文鏈接在網(wǎng)頁尾部。

蛋白質(zhì)熒光報告系統(tǒng)對于深入的生命科學(xué)研究至關(guān)重要，為體內(nèi)微觀生物活性的可視化提供了系統(tǒng)的標記工具，并徹底改變了基礎(chǔ)研究。棉花體細胞再生效率低，造成棉花轉(zhuǎn)化困難。有利于利用熒光報告系統(tǒng)篩選轉(zhuǎn)基因體細胞胚胎。然而，目前棉花中可用的熒光標記系統(tǒng)有限。為了優(yōu)化棉花的熒光報告系統(tǒng)，擴大可用熒光蛋白的范圍，我們選擇了11種熒光蛋白，涵蓋紅色、綠色、黃色和青色熒光顏色，并用棉花表達。除mRuby2和G3GFP外，其他9種熒光蛋白（mCherry，tdTomato，sfGFP，Clover，EYFP，YPet，mVenus，mCerulean和ECFP）在轉(zhuǎn)基因愈傷組織和胚胎中穩(wěn)定而強烈地表達，并在來自不同的棉花器官中遺傳自篩選的胚胎。此外，表達tdTomato的轉(zhuǎn)基因棉花在白光下呈粉紅色，不僅對愈傷組織、胚胎組織，而且對成熟植物的各種器官也呈粉紅色，為棉花遺傳轉(zhuǎn)化過程提供了視覺標記，加速了轉(zhuǎn)基因事件的評價。此外，我們在體內(nèi)構(gòu)建了表達mCherry標記的轉(zhuǎn)基因棉花細胞器標記物，覆蓋了七個特定的亞細胞區(qū)室：質(zhì)膜，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，土著體，線粒體，質(zhì)體，高爾基體和過氧化物酶體。我們還提供了一種簡單而高效的策略，使用細胞器標記物快速確定棉細胞中未表征蛋白質(zhì)的亞細胞定位。zui后，我們建立了個使用氣孔特異性表達啟動子（ProKST1，ProGbSLSP和ProGC1）的棉花氣孔熒光報告系統(tǒng)來驅(qū)動三葉草表達。本研究中用于轉(zhuǎn)基因體細胞胚胎篩選和功能基因標記的優(yōu)化熒光標記系統(tǒng)為加速體細胞再生效率和體內(nèi)監(jiān)測棉花中各種細胞過程提供了潛力。

LUYOR-3415RG激發(fā)光源用于熒光觀察

用變焦立體顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花或煙草表皮細胞的胚胎愈傷組織，雄蕊，雌蕊，葉和種子組織中的熒光（奧林巴斯，東京，日本）。用共聚焦電子顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花原生質(zhì)體，氣孔細胞，纖維，葉表皮細胞和根部樣品中的熒光（尼康，東京，日本）。大于 2 厘米的轉(zhuǎn)基因樣品2使用LUYOR-3415RG手持熒光燈（中國上海LUYOR）進行觀察，并使用EOS 800D相機（佳能，中國北京）拍攝圖像，并帶有LUV-495A和LUV-590A熒光拍照濾鏡（LUYOR），用于綠色和紅色熒光觀察。使用濾光片。

上海峰志儀器有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)美國路陽LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)光源，能夠觀察GFP、eGFP、dsred、Mcherry、Tdtomato等綠色熒光蛋白和紅色熒光蛋白的表達，針對科研院所試用滿意付款。

詳細介紹：便攜式熒光蛋白激發(fā)光源LUYOR-3415RG

Published online 2022 Jan 7

文獻地址：https://doi.org/10.3389/fpls.2021.825212 

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