熒光蛋白為什么被用作熒光標(biāo)簽?
因?yàn)闊晒獾鞍撞坏梢詷?biāo)記固定細(xì)胞及活細(xì)胞中的蛋白,還可以標(biāo)記不同的細(xì)胞類型,甚至可以標(biāo)記亞細(xì)胞器。熒光蛋白因?yàn)轭伾r艷,圖像直觀,不需要化學(xué)染色和底物,是活細(xì)胞分析的理想選擇。它常用于追蹤啟動(dòng)子活性、產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞系、標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器用于體內(nèi)成像等。
怎么選擇合適的熒光蛋白做標(biāo)簽?
熒光蛋白作為熒光標(biāo)簽用于實(shí)驗(yàn)研究要選擇適合的,不是任何一種都可以。
1)要考慮你選擇的這這個(gè)熒光蛋白的熒光顏色和你的本體顏色有大的區(qū)別,而熒光蛋白被激發(fā)后的顏色是由其發(fā)射波長(zhǎng)決定的,激發(fā)它發(fā)出熒光也要選擇正確的激發(fā)光源波長(zhǎng)。
2)如果做多重實(shí)驗(yàn),就必須確保這幾種熒光蛋白的發(fā)射波長(zhǎng)不重疊。
3)另外要考慮實(shí)驗(yàn)的對(duì)象,如果是體外實(shí)驗(yàn)就無(wú)所謂,大部分波長(zhǎng)都可以,但如果是體內(nèi)研究如小動(dòng)物成像,要選擇那些在遠(yuǎn)紅外區(qū)的長(zhǎng)波,它能有效穿透身體組織,發(fā)揮作用。
4)不同熒光蛋白適用于不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模喝缬械倪m合標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器,追蹤啟動(dòng)子活性,有的適合構(gòu)建融合蛋白(蛋白定位研究和產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系用于長(zhǎng)期培養(yǎng)),有的適合作為目的蛋白轉(zhuǎn)錄和翻譯的指示劑,有的適合三色分析,如黃、綠、紅三色熒光蛋白
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒篩選GFP陽(yáng)性的小鼠(圖片轉(zhuǎn)自https://www.xepu.cn )
熒光蛋白激發(fā)光源都有哪些?
熒光蛋白在激發(fā)光源的激發(fā)下才能發(fā)出熒光進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的觀測(cè)及研究。不同的熒光蛋白激發(fā)光源不一樣,需要根據(jù)其激發(fā)波長(zhǎng)選擇合適的激發(fā)光源。上海峰志儀器有限公司擁有多種熒光蛋白激發(fā)光源,有單波長(zhǎng)激發(fā)光源,有雙波長(zhǎng)激發(fā)光源,也有多波長(zhǎng)激發(fā)光源,另外樣式可根據(jù)應(yīng)用場(chǎng)景選擇手電筒式、手持式、桌面式等。
熒光蛋白激發(fā)燈用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光,研究人員通過(guò)觀測(cè)熒光并記錄以實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的研究。熒光蛋白激發(fā)燈作為激發(fā)重要的一個(gè)工具該怎么選,上海峰志儀器有限公司教你3步選好:
先看熒光蛋白
不同熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)是不一樣的,就算是同系列的熒光蛋白佳激發(fā)波長(zhǎng)也是不一樣的。首先要了解被激發(fā)的熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)是多少?再選擇這個(gè)波長(zhǎng)的激發(fā)燈,這樣激發(fā)出的熒光才足夠亮且穩(wěn)定。
用于什么場(chǎng)景
不同用戶對(duì)于熒光蛋白的應(yīng)用是不一樣的,如:種子篩選、植物愈傷組織觀測(cè)、轉(zhuǎn)基因驗(yàn)證、細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)……針對(duì)不同的使用場(chǎng)景需要的激發(fā)燈樣式不一,照射面積不一……
熒光蛋白激發(fā)燈廠家
確定了以上2步就差不多做好了功能選項(xiàng),第三部就是看熒光蛋白激發(fā)燈廠家,通過(guò)售前、質(zhì)量、價(jià)格、服務(wù)、技術(shù)……綜合選擇
常見(jiàn)熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)如下:
1)紅色熒光蛋白R(shí)FP:激發(fā)波長(zhǎng)532nm(綠光),發(fā)射波長(zhǎng)588nm;
2)綠色熒光蛋白GFP:激發(fā)波長(zhǎng)為 488 nm(藍(lán)光或紫光),發(fā)射波長(zhǎng)507 nm;
3)藍(lán)色熒光蛋白BFP: 激發(fā)波長(zhǎng)在400nm(紫)左右,發(fā)射波長(zhǎng)在450nm左右;
4)黃色熒光蛋白YFP: 大激發(fā)波長(zhǎng)為514 (綠光)nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm。
上海峰志儀器有限公司專注熒光檢測(cè)燈20年,銷售的美國(guó)路陽(yáng)和析浦科學(xué)儀器的熒光蛋白激發(fā)光源有單光源、雙光源、多光源可選。熒光蛋白激發(fā)燈樣式從便攜手電式到大面積桌面式都有,研發(fā)的光學(xué)透鏡使其光照度超過(guò)同條件的其他檢測(cè)燈,另外也可根據(jù)用戶實(shí)際需求進(jìn)行定制。
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒
上圖:LUYOR-3415RG雙波長(zhǎng)熒光蛋白激發(fā)光源
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