觀察綠色熒光蛋白的儀器叫什么?
能夠激發(fā)綠色熒光蛋白的發(fā)出熒光的儀器叫熒光蛋白激發(fā)光源,又叫熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈,熒光觀察手電筒,有便攜式熒光蛋白激發(fā)光源、臺(tái)式熒光蛋白激發(fā)光源等多種款式。
LUYOR-3415T手持式熒光蛋白激發(fā)光源可檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、eGFP、tdtomato、cherry、dsred、dapi、hoechst、cfp、bfp、yfp、venus、lucife等多種熒光蛋白的表達(dá)。
觀察綠色熒光蛋白的儀器的原理是什么?
觀察綠色熒光蛋白的儀器又叫熒光蛋白激發(fā)光源,這種便攜式熒光蛋白激發(fā)光源通過內(nèi)部大功率led發(fā)出的激發(fā)光激發(fā)熒光蛋白發(fā)光,觀察人員通過熒光觀察眼鏡觀察到熒光蛋白的熒光。
觀察綠色熒光蛋白的儀器有哪些?
能夠激發(fā)綠色熒光蛋白的發(fā)出熒光的主要有熒光顯微鏡、熒光體視顯微鏡、便攜式熒光蛋白激發(fā)光源、臺(tái)式熒光蛋白激發(fā)光源等產(chǎn)品。熒光顯微鏡需要對(duì)觀察的目標(biāo)進(jìn)行切樣觀察,而手持的便攜式熒光蛋白激發(fā)光源無需破壞觀察目標(biāo)可以直接觀察,特別是觀察熒光蛋白在種子、愈傷、葉片等的表達(dá),非常方便,佩戴上熒光觀察眼鏡,打開熒光蛋白激發(fā)光源的開關(guān)就可以直接觀察到熒光表達(dá)的效果。
傳統(tǒng)的熒光顯微鏡觀測(cè)熒光蛋白有很多局限性,上海峰志儀器有限公司代理銷售的美國(guó)路陽生產(chǎn)的便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈給轉(zhuǎn)基因研究工作者帶來了便捷性,無需取樣,打開觀測(cè)燈直接照射熒光蛋白,肉眼就能清晰看到熒光蛋白在葉片、愈傷、種子、菌落等載體上的表達(dá)。無論是綠色熒光蛋白、黃色熒光蛋白或紅色熒光蛋白,一臺(tái)觀測(cè)燈就能直接觀測(cè)2種熒光蛋白的表達(dá)?,F(xiàn)上海峰志儀器有限公司技術(shù)工程師針對(duì)綠色熒光蛋白的觀測(cè)原理、幾種觀測(cè)方法介紹如下:
綠色熒光蛋白(GFP):
綠色熒光蛋白GFP吸收的光譜峰值為395nm(紫外),并有一個(gè)峰值為470nm的副吸收峰(藍(lán)光);發(fā)射光譜峰值為509nm(綠光),并帶有峰值為540nm的側(cè)峰。雖然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于該激發(fā)光對(duì)細(xì)胞的傷害小,因此通常多使用該波段光源(多為488nm)。GFP熒光極其穩(wěn)定,在激發(fā)光照射下,GFP抗光漂白能力比熒光素強(qiáng),特別是在450~490nm藍(lán)光波長(zhǎng)下穩(wěn)定。類似的,GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高,抗光漂白能力強(qiáng),因此適用于定量測(cè)定與分析。由于GFP熒光的產(chǎn)生不需要任何外源反應(yīng)底物,因此GFP作為一種廣泛應(yīng)用的活體報(bào)告蛋白,其作用是任何其它酶類報(bào)告蛋白無法比擬的。但因?yàn)镚FP不是酶,熒光信號(hào)沒有酶學(xué)放大效果,因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報(bào)告蛋白,比如螢火蟲熒光素酶等。
綠色熒光蛋白的激發(fā)觀察的幾種方法
1. 便攜式紫外光源
采用LUYOR-3410UV便攜式紫外光源(又叫高強(qiáng)度紫外線燈、黑光燈)觀察也非常方便,但如果觀察植物,植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會(huì)發(fā)出熒光,對(duì)gfp發(fā)出的熒光也會(huì)產(chǎn)生干擾,另外,標(biāo)本長(zhǎng)時(shí)間在紫外光源照射下對(duì)GFP標(biāo)本組織也會(huì)造成破壞。
GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)
上圖:熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈照射煙草葉片,GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)
2. 便攜式GFP激發(fā)光源
采用LUYOR-3415RG便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測(cè)鏡、熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈)是便捷、方便的觀察方法,因GFP在470nm有一個(gè)很高的吸收峰,采用 470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光,在觀察gfp熒光時(shí),因?yàn)榧ぐl(fā)光為強(qiáng)烈的藍(lán)色光線,佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號(hào)。
3、熒光顯微鏡
熒光顯微鏡: 熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。目前在常用的方法就是采用熒光顯微鏡觀察,熒光顯微鏡在實(shí)驗(yàn)室普及。
但熒光顯微鏡的缺點(diǎn)是需要取樣才能觀察,如果樣本過大,無法放置在熒光顯微鏡上面,需要破壞樣本進(jìn)行取樣。 觀察植物葉片需要摘取葉片才能觀察。有時(shí)候觀察組培苗,組培苗在組培瓶里面無法取出,就無法在熒光顯微鏡下觀察,熒光顯微鏡在觀察熒光時(shí)候還是有很多的局限性。
總之,如果要激發(fā)熒光蛋白的熒光,觀測(cè)熒光蛋白的表達(dá)效果,LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈是相對(duì)理想的觀測(cè)工具,上海峰志儀器有限公司銷售的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈檢測(cè)轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白(GFP)基因、紅色熒光蛋白(DsRed);檢測(cè)基因植物:水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥;檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因動(dòng)物:小鼠、兔子、猴子等;檢測(cè)轉(zhuǎn)GFP、DsRed基因微生物:細(xì)菌、真菌、酵母等檢測(cè)GFP、DsRed基因組織特異性表達(dá)。上海峰 志儀器為美國(guó)路陽授權(quán)代理商,現(xiàn)貨供應(yīng)美國(guó)路陽的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測(cè)燈。
上海峰志儀器有限公司代理銷售各種生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室用實(shí)驗(yàn)儀器,主要有紫外透射儀、紫外交聯(lián)儀、分子雜交箱、實(shí)驗(yàn)室大面積紫外線燈、便攜式高強(qiáng)度紫外線燈、便攜式熒光蛋白觀測(cè)燈、超凈工作臺(tái)、LED光化學(xué)反應(yīng)儀、生物毒性照射儀等,上海峰志為國(guó)外多家生命科學(xué)儀器公司授權(quán)代理商。
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